Kandungan
Alkohol sejuk digunakan untuk memisahkan DNA daripada penyelesaian berasaskan air, yang membolehkannya disucikan untuk ujian genetik berikutnya. Menambah alkohol untuk penyelesaian yang mengandungi DNA adalah cara mudah untuk menjadikannya tulen pada suhu yang lebih rendah dan melambatkan enzim yang merendahkannya, memberikan hasil pengekstrakan yang lebih baik.
Memecahkan Dinding Sel
Prosedur pengekstrakan untuk memperoleh DNA tulen perlu menyingkirkan semua komponen molekul dan kimia tisu yang mana DNA diekstrak. Langkah pertama melibatkan pemusnahan dinding sel. Ini boleh dilakukan dengan pelbagai agen kimia yang kaustik ke membran sel tetapi tidak merosakkan DNA. Sel-sel juga boleh diawasi, homogen atau ditanam untuk memusnahkan membran.
Mengeluarkan lipid
Apabila dinding sel telah dimusnahkan, detergen ditambah untuk menyingkirkan lemak dan minyak yang membentuk membran sel. Detergen menyebabkan pembubaran minyak dan lemak dalam larutan.
Mengeluarkan protein
Protein dan enzim boleh dicerna dengan menambahkan protease kepada penyelesaian. Protease memecah protein menjadi peptida kecil dan asid amino.
Mengesan DNA
Penambahan alkohol ais sejuk untuk penyelesaian akan menimbulkan dan mengagregat DNA. Bahan genetik boleh dikumpulkan dengan menyentuh sampel dan menumpahkan lapisan cecair. Ia harus wujud sebagai sedimen kecil di bahagian bawah tiub centrifuge.
Memurnikan DNA
DNA boleh dibasuh dengan menggantung semula larutan alkohol sejuk dan disenyapkan semula beberapa kali untuk mendapatkan sampel yang sangat tulen. Alkohol yang biasa digunakan termasuk etanol dan isopropanol. Proses ini meninggalkan sampel yang sangat tulen dalam ujian yang ketat.
