Kandungan
Kromatografi cecair berprestasi tinggi (HPLC) adalah alat yang digunakan untuk memisahkan bahan dari campuran. Pemisahan dan pengenalpastian bahan kimia tertentu berlaku terutamanya pada lajur kromatografi sistem. Banyak jenis lajur tersedia untuk CLAE, dan masing-masing digunakan untuk jenis analisis tertentu. Lajur C18 adalah nonpolar terkuat yang biasanya digunakan. Setelah digunakan secara berterusan untuk jangka masa yang panjang, kadar aliran pelarut melaluinya berkurang dan masa analisis meningkat. Penyebab lain penurunan masa analisis adalah dengan mengambil sampel yang meninggalkan sejumlah kecil bahan kimia dalam bahan lajur, mengurangkan kemampuan untuk memisahkannya. Pemulihan permukaannya dapat dilakukan dengan merawat bahan dengan serangkaian pelarut khusus untuk membersihkannya dari sisa sampel dan menghidupkan semula bahan sokongan.
Langkah 1
Tanggalkan lajur C18 dari arah aliran dan letakkan ke arah yang bertentangan. Mengembalikan pelarut akan mengurangkan kesan pengumpulan yang berlaku dari masa ke masa. Berhati-hati agar tidak terlalu banyak bahan terkumpul di hujung lajur. Beberapa kilang menggunakan mesh yang lebih besar di bahagian atas sehingga ketika aliran berubah arah, mesh berada pada posisi di bawah. Kaedah pemulihan ini disebut pembalikan aliran. Untuk mengelakkan penumpukan mengalir ke pengesan sistem dan mungkin menyebabkan halangan, biarkan berfungsi tanpa pengesan tersambung dan arahkan aliran dari lajur ke pembuangan.
Langkah 2
Letakkan tiub pelarut dalam satu siri pelarut untuk mengeluarkan sebatian yang ditahan di lajur dalam arah yang bertentangan. Pelarut ini berbeza dalam ciri hidrofiliknya. Dengan mengubahnya, anda akan mengeluarkan sebatian hidrofilik yang sama pelbagai. Gunakan 50 ml setiap pelarut berikut, berturut-turut: air (jika anda menggunakan penyangga), metanol, isopropanol, diklorometana, heksana, diklorometana dan isopropanol.
Langkah 3
Gantikan lajur ke arah yang betul dan jadikan pelarut mengalir melaluinya. Gunakan sekurang-kurangnya 75 ml untuk mencucinya sebelum meneruskan. Uji dengan corak yang anda gunakan ketika masih baru dan periksa hasilnya. Perhatikan ketika mencapai titik pengekalan maksimum dan jumlah masa analisis. Sejauh mana atribut ini sesuai dengan ujian awal ketika masih baru akan menunjukkan sejauh mana lajur dipulihkan. Sekiranya hasilnya tidak memuaskan, ganti lajur dengan yang baru dan buang yang lama.
