Kandungan

• Visualisasi yang lebih baik
• Pengenalpastian dan klasifikasi
• Pengesanan kelayakan
• Pengenalpastian struktur selular

Mikrobiologi mempelajari ciri-ciri mikroorganisma, seperti alga, bakteria, protozoa, kulat dan virus, menggunakan mikroskop. Walaupun sesetengah organisma, seperti sel protozoa dan ragi mudah dilihat melalui slaid, sel-sel bakteria memerlukan pewarnaan. Para saintis telah mengembangkan beberapa kaedah, seperti teknik pewarnaan Gram, pewarnaan asid cepat dan pewarnaan neon untuk meningkatkan visualisasi sel bakteria dan struktur sel. Menggunakan kaedah pewarnaan sedemikian, adalah mungkin untuk mengenal pasti ciri-ciri struktur yang membantu mengelaskan bakteria.

Teknik pewarnaan membantu meningkatkan visualisasi bakteria (Duncan Smith / Stockbyte / Getty Images)

Visualisasi yang lebih baik

Organisma bakteria sangat kecil sehingga kebanyakannya hanya dapat dilihat di bawah mikroskop dengan kekuatan pembesaran 1000 kali. Walau bagaimanapun, pembesaran mudah tidak memberikan tahap kejelasan yang mencukupi, jadi bakteria perlu diwarnakan sebelum pemerhatian untuk memberikan kejelasan yang diperlukan untuk visualisasi.

Pengenalpastian dan klasifikasi

Pewarnaan bakteria untuk membezakan antara jenis bakteria dikenali sebagai pewarnaan perbezaan. Pewarnaan Gram adalah pewarnaan berbeza yang membezakan bakteria sebagai fungsi kandungan dinding sel. Dalam kaedah ini, sel-sel bakteria bertindak balas dengan pewarna kristal violet untuk menghidupkan ungu. Dengan menambahkan ejen perubahan warna, beberapa sel bakteria akan kehilangan warna, sementara yang lain tidak. Dengan menambah pewarna safranin, sel-sel yang berubah-ubah mengambil pewarnaan merah, manakala sel-sel bakteria yang tidak kehilangan warna kekal violet. Sel merah dipanggil organisma gram-negatif dan mereka yang tidak berubah menjadi merah dikelaskan sebagai organisma gram-positif. Teknik pewarnaan Gram menyediakan kaedah pesat untuk pengenalan awal bakteria yang terlibat dalam jangkitan. Begitu juga proses pewarnaan asid yang membantu membantu mengenal pasti organisma kepunyaan kelas bakteria yang dipanggil mikobakteria, seperti Mycobacterium tuberculosis.

Pengesanan kelayakan

Dalam sampel budaya bakteria, selalunya penting untuk mengesan kehadiran sel-sel bakteria hidup. Kaedah-kaedah seperti pewarnaan pendarfluor membantu untuk mengenal pasti sama ada sel-sel kultur adalah berdaya maju atau tidak. Bakteria hidup mempunyai keupayaan untuk menukar tetrazolium klorida 5-cyano-2,3-ditolyl (CTC) ke dalam pewarna yang menunjukkan pendarfluor merah. Oleh itu, apabila budaya berwarna CTC memancarkan pendarfluor ini, ini menunjukkan kehadiran bakteria yang berdaya maju. Propidium iodide adalah pewarnaan yang bertindak hanya pada sel tidak hidup yang telah membran membran dan oleh itu berguna dalam mengenal pasti sel-sel bakteria yang mati.

Pengenalpastian struktur selular

Pewarna menyediakan kaedah visualisasi yang jelas untuk pelbagai struktur sel. Sebagai contoh, kaedah pewarnaan Feulgen membolehkan pengenalpastian nukleus di dalam sel-sel bakteria, manakala pewarnaan Albert berguna dalam visualisasi granul metachromatik. Begitu juga, teknik perak impregnasi membolehkan pengenalpastian spirochetes. The flagella mudah dilihat ketika mereka berwarna dengan pewarnaan Ryu. Pewarnaan hijau malachite membantu mengenal pasti spora bakteria.